Jak vytvořit konzistentní chov: 9 kroků

V chemii se ředění nazývá proces, v důsledku toho se koncentrace látky sníží v roztoku. Sekvenční ředění se skládá z opakovaných ředění, což umožňuje rychle snížit počáteční koncentraci. Tato metoda se používá při pokusech, ve kterých jsou vysoce zředěné roztoky vyžadovány s přesnou koncentrací, často určenou logaritmickou stupnicí, nebo když je nutné najít hustotu bakterií. Sekvenční chov je široce používán v experimentálních vědách, jako je biochemie, mikrobiologie, farmakologie, fyzika.

Kroky

Metoda 1 z 2:

Sekvenční ředění

jeden. Vyberte si vhodné rozpouštědlo. Při chovu je velmi důležité vybrat správné rozpouštědlo nebo pufr. Mnoho řešení může být disociována s destilovanou vodou, ale není to vždy. Pokud zředíte bakterie nebo jiné buňky, budete potřebovat příslušné kulturní prostředí. Vybraný pufr by měl být používán se všemi postupnými ředěními.

Pokud si nejste jisti, že je lepší použít jako vyrovnávací paměť, požádat učitele nebo hledat potřebné informace na internetu: možná někdo již připravil takové řešení.

Obrázek s názvem Do sériové ředění Krok 2

2. Připravte několik trubek s 9 mililitry pufru. Tyto zkumavky budou hrát roli chovných polotovarů. Zředěný vzor vložíte do první zkumavky a pak postupně přenáší roztok do následujících zkumavek.

Před zahájením práce je užitečné označit všechny zkumavky používané tak, aby se nemohly zaměňovat řešení v procesu chovu.

Každá další zkumavka bude obsahovat 10krát méně koncentrovaného roztoku než předchozí. V první zkumavce bude koncentrace roztoku 1:10, ve druhé - 1: 100, ve třetím - 1: 1000, a tak dále. Určit předem, kolik zředění, které potřebujete, a připravte odpovídající počet trubek.

Obrázek s názvem Do sériové ředění Krok 3

3. Připravte zkumavku s nejméně 2 mililitry nezředěných roztoků. Pro konzistentní ředění vyžaduje tato metoda alespoň 1 millilita nezředěného roztoku. Pokud je pouze 1 mililitr, nebudete mít nerozdělené řešení. Napište na tuto zkumavku Nr (nerozvinutý roztok).

Před každým chovu, důkladně promíchejte roztok.

Obrázek s názvem Do sériové ředění Krok 4

4. Strávit první chov. Typ 1 millilitr zředěný s zkumavkami v pipetě Nr a rozbít se do zkumavky se značkou 1:10, který obsahuje 9 mililitrů pufru, po kterém důkladně mícháte. V důsledku toho dostanete roztok, zředěný 9 mililitry pufru. Koncentrace roztoku se tak sníží za desetkrát.

Obrázek s názvem Do sériové ředění Krok 5

Pět. Připravte si následující řešení. Pro druhé konzistentní chov, trvat 1 mililitrem roztoku ze zkumavky 1:10 a přidejte do 9 mlilitrů pufru ve zkumavce 1: 100. Dříve smíchejte roztok ve zkumavce 1:10. Po přidání roztoku do zkumavky 1: 100, Důkladně smíchejte její obsah. Výsledkem je, že chováte řešení ze zkumavky 1:10, A budete mít nové řešení s koncentrací 1: 100.

Obrázek s názvem Do sériové ředění Krok 6

6. Pokud je to nutné, pokračujte v chovu řešení. Tento proces lze opakovat tolik, kolik nedosáhnete požadované koncentrace. Pokud by experiment měl stanovit závislost na koncentraci, je možné postupně připravit roztoky 1, 1:10, 1: 100, 1: 1000.

Metoda 2 z 2:

Výpočet chovného a konečného součinitele koncentrace

jeden. Určit součinitel Zředění konečného roztoku. Chcete-li to udělat, vynásobte všechny postupné chovné koeficienty. Odpovídající vzorec má následující formulář: D_T = D_jeden XD₂ XD₃ x ... x d_N, kde D_T - Společný chovný koeficient, D_N - N-th ředicí koeficient.

Předpokládejme, že 4 krát provedl chov s poměrem 1:10. Nahraďte tento koeficient ve vzorci a získejte d_T = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000.
Po posledním chovu ve čtvrté zkumavce je roztok 1:10.000, to znamená, že konečné řešení bude v 10.000 méně koncentrované než původní (nerozvinutý).

Obrázek s názvem Do sériové ředění Krok 8

2. Určete koncentraci roztoku po chovu. Pro stanovení koncentrace roztoku po konzistentním chovu je nutné znát počáteční koncentraci. Použijte vzorec C_Konečný = C_Zdroj/ D, kde C_Konečný - Koncentrace rozvedeného roztoku, C_Zdroj - původní koncentrace, D - Určeno nad koeficientem chovu.

Příklad: Pokud byla koncentrace počátečního roztoku 1 1.000.000 buněk na mililitr a chovný koeficient je 1.000, co se rovná koncentraci konečného řešení?

Používáme vzorec:

C_Konečný = C_Zdroj/ D

C_Konečný = 1.000.000/1.000

C_Konečný = 1.000 buněk na mililitr.

Obrázek s názvem Do sériové ředění Krok 9

3. Zkontrolujte dimenzi. Při provádění případných výpočtů byste měli ujistit, že jste obdrželi správné jednotky měření. Pokud jste začali od počtu buněk na mililitr, ujistěte se, že výsledek je také získán v těchto jednotkách. Pokud se vypočítáte v ppm (ppm), musí být výsledná koncentrace také vyjádřena v programu PROHLILIT.